高效液相色谱法测定人血中氢溴酸右美沙芬浓度
摘要：目的研究氢溴酸右美沙芬在康健自愿者体内的血药浓度。要领接纳高效液相色谱法测定8例康健受试者口服右美沙芬糖浆和片剂后差别时间血浆中的美沙芬浓度。 氢溴酸右美沙芬（dextromethorphanhydrobromide ，DM）是一种中枢性镇咳药 ，其作用机制是通过阻断咳嗽中枢反射以提高中枢神经系统咳嗽阈值而起镇咳作用 ，其作用与磷酸可待因相当 ，但无可待因的镇痛和镇静作用 ，无成瘾性 ，治疗剂量不会抑制呼吸中枢和呼吸道黏膜渗透 ，临床应用镇咳效果显著 ，不良反应爆发率低 ，临床应用极为清静 ，具有服用剂量少而镇咳效果好的优点 ，临床上普遍应用。本实验通过接纳HPLC法测定DM在8例正凡人体内的血药浓度 ，进而对DM糖浆和片剂的生物使用度作出评价。现报告如下。
1、仪器与试药?
日本Waters高效液相色谱仪 ，Ubondpakphenyl色谱柱 ，电子剖析天平 ，旋涡混淆器 ，电动振荡器 ，离心机等 ；
乙腈为色谱纯 ，其他试剂均为剖析纯 ；DM标准品 ，瑞士罗氏药厂生产 ；DM糖浆 ，广东罗定制药有限公司生产 ；每10ml含DM15mg ，DM片剂 ，广州光华药业有限公司生产 ，每1片含DM15mg。
2、实验要领与效果
2。1色谱条件Ubondpakphenyl色谱柱 ，流动相：10mm磷酸氢二钾缓冲液っ∶っ乙腈（55っ∶っ45 ，pH4。0） ；检测波长：220nm ；流速1。0ml/min。?
2。2标准曲线制作与接纳率测定准确称取氢溴酸右美沙芬标准品25mg ，置25ml量瓶中 ，加蒸馏水使消融并稀释至刻度 ，摇匀 ，配成浓度为1mg/ml的标准品溶液 ，再将其稀释成1μg/ml ，划分吸收5、10、25、50、75、100、200、300、400、500μl ，加入1ml人新鲜空缺血浆中 ，混匀 ，配成浓度为5~500ng/ml的右美沙芬标准血浆溶液。?
准确称取地平泮标准品25mg ，置25ml量瓶中 ，加甲醇消融后加水稀释至刻度 ，配成浓度为1mg/ml的安定标准品溶液 ，同样将其稀释成1μg/ml ，作为内标液。上述各浓度氢溴酸右美沙芬标准血浆溶液均加入100μl内标液 ，混匀 ，然后加入正己烷っ∶っ正丁醇（10っ∶っ1）混淆溶剂6ml和0。1NNaOH溶液0。5ml ，水平振荡20min后 ，离心10min ，将上层有机溶液吸入试管中 ，加入0。1NHCL溶液200μl ，水平振荡20min后 ，离心15min ，下层酸液100μl用于HPLC进样剖析 ，吸收20μl ，按上述色谱条件剖析 ，凭证测得的美沙芬和内标色谱峰高算出峰高比。以美沙芬浓度为横坐标 ，峰高比为纵坐标 ，绘制标准曲线 ，得回归方程：Y=0。0128X 0。0276 ，r=0。9965。?
吸收上述各浓度经提取处置惩罚后氢溴酸右美沙芬标准血浆溶液和氢溴酸右美沙芬标准水溶液同时进样剖析举行较量 ，求得美沙芬在血浆中的提取接纳率为92。6%（n=15）。
2。3要领重现性选择10、50、100、300ng/ml四个浓度的氢溴酸右美沙芬标准血浆溶液 ，在同1天内和差别天间经提取处置惩罚后进样剖析 ，划分求出峰高比的日内变异系数和日间变异系数。四个水平的日内变异系数为1。2%~7。3% ，日间变异系数为1。9%~8。3%。
2。4实验设计与血样收罗选择8例无胃肠道疾病 ，肝肾功效检查均正常 ，实验前2周未服用任何药物的康健受试者 ，随机分为两组 ，按交织设计举行两次实验 ，两次实验距离1周。实验当天两组受试者于早晨空腹举行静脉插管并采血3ml作为空缺比照 ，然后划分单剂量口服两种美沙芬60mg ，糖浆40ml ，片剂4片 ，用200ml开水送服。服药后划分于0。25、0。5、0。75、1、1。5、2、3、5、8、12h采血3ml ，在2500转/min离心15min ，疏散出血浆 ，置-25℃冰箱中冷冻生涯至测定。服药后4h各受试者统一进食 ，实验时代忌烟酒 ，亦未服用任何其他药物。
2。5美沙芬血药浓度测定用HPLC按内标法举行定量测定 ，吸收各时间点血浆样本1ml ，按标准曲线制作项下所述举行提取处置惩罚后进样剖析 ，将测得的美沙芬峰高比代入标准曲线方程 ，求出血浆样本中的美沙芬浓度。
3、讨论
3。1本实验接纳高效液相色谱法测定氢溴酸右美沙芬的血药浓度 ，迅速度高 ，准确性好。?
3。2从氢溴酸右美沙芬的血药浓度曲线图可以知道 ，美沙芬糖浆的人体药代动力学特征与片剂相似 ，但达峰血药浓度比片剂高 ，其生物使用度高于片剂。
3。3美沙芬的人体血药浓度较低 ，为知足检测迅速度要求 ，且美沙芬的清静性较好 ，本实验中试验剂量为60mg ，比临床单次常用剂量（15~30mg）为高 ，但不凌驾临床1d的最大用药量120mg ，试验中未见有不良反应爆发。
(泉源：中国化工仪器网)
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